高通量蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析可用于評估大量蛋白質(zhì)在不同條件下的穩(wěn)定性，其目的在于篩選出穩(wěn)定性高、適合進(jìn)一步研究和應(yīng)用的蛋白質(zhì)候選物，廣泛應(yīng)用于藥物篩選、成藥性分析、生物技術(shù)藥物研發(fā)等領(lǐng)域。
 

　　差示掃描熒光法(DSF)：
 

　　原理：通過檢測當(dāng)溫度升高或變性劑存在時，蛋白質(zhì)內(nèi)源熒光的發(fā)射光譜變化來確定蛋白質(zhì)的變性轉(zhuǎn)變溫度(熱轉(zhuǎn)變溫度Tm值或化學(xué)變性Cm值)。
 

　　特點(diǎn)：無需對待測樣品進(jìn)行標(biāo)記或使用熒光探針，即可快速測量整塊樣品微孔板，提供高通量數(shù)據(jù)。
 

　　其他方法：
 

　　生化方法：如圓二色譜(CD)等，用于研究蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)。
 

　　差示掃描量熱法(DSC)：雖然常被視為蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析的重要解決方案，但由于對大量樣品的快速分析需求受限，其在藥物篩選和早期開發(fā)中的應(yīng)用受到一定限制。

 

　　高通量蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析系統(tǒng)的技術(shù)特點(diǎn)：
 

　　高通量：能夠在短時間內(nèi)獲取盡可能多的信息。
 

　　低成本：使用標(biāo)準(zhǔn)的384孔板，無需特殊耗材以及毛細(xì)管，一次成本較低。
 

　　寬溫度掃描范圍：具有10℃~105℃的寬溫度掃描范圍，能夠覆蓋多個蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)域。
 

　　高靈敏度：采用高靈敏度的CMOS檢測器，能夠準(zhǔn)確檢測熒光變化。
 

　　樣品用量少：樣品用量僅需微量，濃度范圍廣泛，適用于多個階段的穩(wěn)定性分析。
 

　　高通量蛋白質(zhì)穩(wěn)定性分析系統(tǒng)的應(yīng)用：
 

　　加速突變體的篩選：通過高通量分析，可以快速篩選出穩(wěn)定性提高或降低的突變體。
 

　　配方和預(yù)配方的篩選和優(yōu)化：在藥物研發(fā)中，用于篩選和優(yōu)化藥物的配方。
 

　　蛋白結(jié)晶條件篩選：幫助確定適合蛋白質(zhì)結(jié)晶的條件。
 

　　批間一致性評估：確保不同批次生產(chǎn)的蛋白質(zhì)具有一致的穩(wěn)定性。
 

　　生物相似性評估：在生物技術(shù)藥物研發(fā)中，用于評估不同來源或制備方法的蛋白質(zhì)之間的相似性。
 

　　加速應(yīng)力和強(qiáng)制降解研究：研究蛋白質(zhì)在特定條件下的降解情況，為藥物儲存和運(yùn)輸條件的確定提供依據(jù)。